使用恒溫培養(yǎng)箱進行乳糖發(fā)酵實驗

乳糖發(fā)酵( Lactose Fermentation Experiment ) 是常用的鑒別微生物的生化反應，在腸道細菌的鑒定上尤為重要，是初步鑒定腸道致病菌與非致病菌常用的試驗。應用于食品，環(huán)境行業(yè)比較多.下面小編給大家介紹一下乳糖檢測的實驗方法，供大家參考

一、乳糖發(fā)酵實驗

1、取10ml水樣接種到10ml雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，取1ml水樣接種到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，另取1ml水樣注入到9ml滅菌生理鹽水中，混勻后吸取1ml（即0.1ml水樣）注入到10ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，每一稀釋度接種5管。對已處理過的出廠自來水，需經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的，可直接種5份10ml水樣雙料培養(yǎng)基，每份接種10ml水樣。

2、檢驗水源水時，如污染較嚴重，應加大稀釋度，可接種1，0.1，0.01ml甚至0.1，0.01，0.001ml，每個稀釋度接種5管，每個水樣共15管。接種1ml以下水樣時必須作10倍遞增稀釋后，取1ml接種，每遞增稀釋一次，換用1支1ml滅菌刻度吸管。

3、將接種管置36±10℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24h±2h，如所有乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)酸，則可報告為總大腸菌群陰性，如有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，則按下列步驟進行。

二、分離培養(yǎng)：經(jīng)培養(yǎng)24h后，將產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管，分別接種于伊紅美藍平板上，36±10℃慍溫培養(yǎng)8h-24h，觀察形態(tài)，挑取數(shù)個可疑菌落進行涂片、革蘭氏染色、鏡檢。

三、證實試驗：挑取可疑管接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，置于36±10℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，即證實有總大腸菌群存在。